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HIV抗体检测

   HIV抗体检测目的

  在孕期,HIV能通过胎盘传染给胎儿,或分娩时经产道及出生后经母乳喂养感染新生儿,所以HIV检查是很有必要的。

  HIV主要通过性传播,包括同性接触及异性接触。所以与HIV/AIDS患者密切接触、有静脉注射毒品、使用进口血液制品、性紊乱及多个性伴侣、患多种性传播性疾病的高危人群,应进行HIV抗体检测。HIV病毒携带者或感染者,应选择终止妊娠。

  HIV抗体检测参考指标

  HIV抗体检测定量的正常值范围是0—1。超过1就是阳性。如果检测结果呈阳性,则需进一步检查。如果是呈阴性,一是受检者没有感染艾滋病病毒;二是虽受到艾滋病病毒感染,但还没有产生足够的能检测出的抗体,仍处窗口期内。如果确实有过高危行为,要随访3-6个月。

  免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。国内常用的确认试验方法是WB。

  (一)免疫印迹实验(westernblot,WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法,就HIV的病原学诊断而言,它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法,WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的金标准”。

  确认试验流程:

  有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测,如果呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如果呈阳性反应,则报告HIV-1抗体阳性;如果不满足阳性标准,则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带,需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验,呈阴性反应,报告HIV-2抗体阴性;呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性,并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析,

  WB的敏感性一般不低于初筛实验,但它的特异性很高,这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化,能够检测针对不同抗原成分的抗体,因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出,初筛试验尽管选择质量较好的试剂,如第三代ELISA,仍会有假阳性出现,必须通过确认试验才能得出准确结果。

  (二)免疫荧光实验(IFA)

  IFA法经济、简便、快速,曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜,需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响,结果不宜长期保存,IFA不宜在一般的实验室开展和应用。

  HIV抗体确证试验结果报告

  HIV抗体确证试验结果用附表3报告。

  (1)符合HIV-1抗体阳性判断标准,报告HIV-1抗体阳性(+)”,并按规定做好检测后咨询、保密和疫情报告工作。符合HIV-2抗体阳性判断标准,报告HIV-2抗体阳性(+)”,并按规定做好检测后咨询、保密和疫情报告工作。

  (2)符合HIV抗体阴性判断标准,报告HIV抗体阴性(-)”。如疑似窗口期”感染,建议进一步做HIV核酸检测,尽早明确诊断。

  (3)符合HIV抗体不确定判断标准,报告HIV抗体不确定(±)”,在备注中应注明等待4周后复检”。

  做HIV抗体检测前注意事项

  1、检测前半小时应适量饮水避免血液过于粘稠。

  2、准备好:酒精,药棉,计时器 并用用清水和肥皂洗干净双手。

  3、检测应在室温4度以上进行操作;扎针取血前应该先用酒精消毒采血部位(一般是手指),然后按摩,促使血液流通。

  4、出血后,可轻轻挤手指,将受检血液滴入加样孔,一般用3滴血。

  5、滴入血液后10秒,滴入1滴缓冲液就足够了,此时开始计时。(如果血液足够顺利到达检测C区可不加缓冲液)

  6、加样后15分钟可以观察结果,一条线为阴性,二条线为阳性,超过30分钟结果不准确。(15-30分钟结果最准确。)

  HIV抗体检测方法

  酶联免疫吸附试验 目前应用的ELISA法有8种之多。它们的特异性和敏感性超过99%。 颗粒凝集法 PA为快速、简便的一种筛选方法。如属阳性,应经WB证实。PA不需任何特殊仪器,其结果用肉眼可判别。全过程仅需5分钟。缺点有假阳性,且价格昂贵。

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